江苏省是我国生猪主产区之一,产业基础良好,是全国生猪产业重点建设区域[1],近年来养猪业迅速发展,规模化、集约化、标准化程度得到了进一步提升,然而制约产业发展的疫病风险,尤其是猪瘟、蓝耳病和伪狂犬病等三种常见病毒性疾病的防控难度不断增大[2]。多年的猪疫病防控实践表明:单纯使用疫苗很难长期控制住一种传染病,还需要有科学的管理和监测手段,以达到有效评估疫苗免疫水平、科学制订或动态调整免疫程序。为了协助江苏省部分地市动物疫病预防控制中心做好疫病预警与免疫评估工作,了解江苏省部分规模化猪场猪瘟、蓝耳病、伪狂犬病三种猪病抗体水平和免疫状况,同时为校企合作单位的客户提供相应的检测服务、指导临床免疫防治,江苏农牧科技职业学院动物流行病学研究中心于2014年4月份—2016年3月份的2年时间里共检测了52个规模猪场3278份血清中的猪瘟、蓝耳病、伪狂犬病抗体,基于检测结果的分析为规模化猪场有效防控这三种猪病提出了一些建议。
1材料
1.1血液样品
采集于江苏省部分规模化猪场,自然析出血清或2500~3000r/min离心5min分离血清,-20℃保存,待测。
1.2检测试剂
猪瘟、猪蓝耳病、猪伪狂犬病ELISA抗体检测试剂盒,均购自美国IDEXX公司。
1.3主要仪器
自动酶标仪(型号为SUNRISE),购自帝肯上海贸易有限公司;自动酶标洗板机(型号为DRW-320),购自无锡华卫德朗仪器有限公司;离心机(型号为SIGMA2-5),购自Sigma公司;BRAND单道及8道移液器,购自普兰德(BRAND)上海贸易有限公司。
2方法
检测方法按照IDEXX检测试剂盒使用说明书进行,结果按照试剂盒给出的条件进行判定。
3结果与分析
3.1猪瘟抗体检测结果
共检测血样3278份,按猪群不同阶段统计阳性率(阻断率≥40%),结果见表1。
由表1中数据可知,送检样品阳性率较低,主要集中在保育猪与育肥猪阶段。育肥猪尤其是育肥中期不合格的样本占较高比例,这就为后期的猪瘟防控带来了较高的压力。从时间段上比较猪瘟抗体阳性率可以看出,2015-04—2016-03时间段总体抗体水平优于2014-04—2015-03时间段的抗体水平。
3.2蓝耳病抗体检测结果
共检测血样3132份,其中未做疫苗血样209份,按猪群不同阶段统计阳性率(S/P≥0.4),结果见表2;按S/P值统计不同阶段猪只所占比例,结果见图1。
由表2中数据可知,蓝耳病抗体阳性率最高的是种猪,其次为保育猪,产房仔猪阳性率最低。保育猪蓝耳病抗体阳性率较高的原因:一是经过了产房阶段的免疫;二是保育阶段的野毒感染。但试剂盒检测并不能区分是疫苗免疫造成的阳性率高还是野毒感染造成的阳性率高,两个原因都可以造成较高的阳性率。
由图1可知,S/P值在2.1~2.5之间时,保育猪所占比例最高,为22.54%,其次是种猪,为18.32%,仔猪最低,为2.76%。S/P值在2.6~3.0之间时,种猪和保育猪所占比例分别为8.65%和8.36%,差异不显著(P<0.05)。
3.3伪狂犬病抗体检测结果
共检测血样3157份,其中检测伪狂犬gB疫苗抗体3157份,检测伪狂犬gI(gE)野毒抗体3123份。按猪群不同阶段统计阳性率(S/N值≤0.6),结果见图2。
由图2可知,规模化猪场伪狂犬(gB)疫苗抗体水平普遍比较理想,但伪狂犬gI野毒抗体的检测出率在部分场和地区检测出率较高,尤其是种猪和育肥猪,其阳性率分别为85.63%和78.80%。这个数据应该引起足够的重视,有的猪场其种猪和育肥猪野毒阳性率竟高达100%,其中不乏一些新建的场。
4讨论与建议
4.1猪瘟的防控
从检测结果看,猪瘟的免疫效果不是十分理想。保育猪的猪瘟抗体水平较低,在55~60日龄二免前水平较低,是由于首次免疫后猪瘟抗体水平上升较慢,在保育阶段结束前(70日龄左右)允许有一定低水平的个体存在,原因是二免后抗体水平2周后可达较高效价。而育肥猪猪瘟抗体水平较低,原因则是多方面的,可从种猪是否存在持续性感染、免疫程序是否合理、疫苗的质量、免疫方法等方面查找原因,尤其要杜绝免疫失败带来的负面影响[3]。结合检测数据与走访调查发现,部分猪场存在免疫不按规范操作且随意加大免疫剂量的情况,总是对疫苗的质量产生怀疑,认为大剂量可以使猪瘟的抗体水平一直增高而达到更好的免疫效果,殊不知大的免疫剂量可以导致机体对猪瘟疫苗的免疫麻痹,并不能诱导较高水平的猪瘟抗体[4]。此外,免疫程序不合理也比较多见。有的猪场在保育舍做首免,有的是在产房前20d做首免,有的是超免,首免日龄最好根据母源抗体水平而定,并不是盲目地照搬,尤其是超免,在不能确保仔猪逐一免疫到位的情况下,超免并不能起到好的效果,反而会造成了人力、物力、财力的浪费。
建议猪场加强经产母猪的免疫,可实行跟胎免疫与普免相结合的方法,防止漏免,提高妊娠期间母源抗体水平,保证仔猪获得足够的母源抗体。同时,产房仔猪首免日龄应根据母源抗体水平而定,可以分阶段检测仔猪的母源抗体,如14,21,28日龄三次采血进行抗体检测,确定首免日龄,间隔21~28d后进行二免。此外,猪群处于亚健康状态时不要注射疫苗,猪瘟疫苗最好是单独免疫,以防与其他病毒性疾病疫苗间相互干扰,影响抗体水平提升的速度。
4.2蓝耳病的防控
根据IDEXX试剂盒大量检测数据统计结果分析来看,对于免疫经典疫苗种猪(公猪、后备公母猪、经产母猪),如果S/P值≥2.5,应暂停引入繁殖群。对于商品猪,当0.4≤S/P≤2.0值才认为是比较好的水平[5-6]。值得一提的是IDEXX试剂盒只检测蓝耳病病毒的N蛋白,反映的是猪群蓝耳病毒的活跃程度,其S/P值的高低和阳性率与疫苗的保护性并不是正相关。检测中也发现一个现象,同阶段的猪群如
果蓝耳病抗体S/P值较高,其猪瘟抗体阻断率<40%(不合格)的概率较高。可以考虑是否有蓝耳病野毒感染而干扰了猪瘟疫苗的免疫效果。不过也不必过于担心,仔细观察猪群的健康状况,如母猪是否流产、仔猪是否感染等再做进一步处理,猪群健康稳定是最重要的原则。此外,在被检的3132份血样中,有209份是没有免疫过蓝耳病疫苗的,但其阳性率也达到了32.33%,表明在当前普遍免疫蓝耳病疫苗的趋势下,要想保持蓝耳病阴性场,其防控压力是相当大的。
建议猪场在加强种猪免疫的同时,定期检测仔猪蓝耳病母源抗体水平,制订合理的免疫程序。在蓝耳病病毒比较活跃的猪场要谨慎选择疫苗,应只选择一种疫苗毒株进行免疫,不要经典毒株与高致病性毒株同时使用。
4.3伪狂犬病的防控
伪狂犬病在当前的流行状况下引起了不少养猪人的疑惑:疫苗免疫强度越来越高,很多猪场种猪的免疫已做到了一年普免4次,商品猪做了滴鼻、二免甚至是三免,但采血检测疫苗抗体水平较高且整齐度好,而野毒阳性率也较高。研究结果表明:伪狂犬病
毒变异后毒力增强了,疫苗的种类与当前流行毒株不匹配,疫苗的抗原浓度达不到规定的免疫剂量,人为的免疫失败以及生物安全措施不到位等一系列原因值得我们深入思考与研究[7-8]。
建议猪场加强引种检测,杜绝伪狂犬野毒抗体阳性的猪进场。同时制订科学的净化方案,每年2~3次(或每个季度1次)分阶段检测伪狂犬疫苗抗体和野毒抗体水平,采样群体以育肥猪和种猪为主,尤其是种公猪也要全部检测,及时淘汰胎龄高的母猪,根据结果或隔离净化或淘汰(按用途)。选择好的疫苗进行免疫,不要因为免疫次数增多而选择所谓便宜的产品来降低成本,其中的道理很简单,能免3次解决问题的绝不免疫4次,这样做既减少了猪群的免疫应激与免疫耐受,也节约了人力、物力与财力。对商品猪没有做二免的猪场,如果保育猪和育肥猪呼吸道问题较多,在做好蓝耳病免疫的同时,可考虑做伪狂犬二免,尤其是在感染压力大的情况下,甚至要进行第三次伪狂犬疫苗免疫。
规模养殖是时代发展的必然趋势[9],面对当前疫病流行的复杂状况,如何采取有效的免疫预防和科学的诊断方法是动物健康养殖的需求,也是养猪人应该思考的问题。紧跟时代步伐,积极转变养殖观念,定期检测不同阶段猪群的抗体水平,动态调整免疫程序,确保猪群有较高的免疫水平及免疫整齐度,从而建立疫病的预警机制,不失为明智的选择。
参考文献:
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